Електрофорезата е лабораторна техника, извършена с цел разделяне на молекулите според техния размер и електрически заряд, така че да може да се направи диагностика на заболяванията, да се провери експресията на протеини или да се идентифицират микроорганизми.
Електрофорезата е проста и евтина процедура, която се използва в лабораторни практики и в изследователски проекти. Според целта на електрофорезата може да се наложи провеждането на други тестове и изследвания, за да се достигне например до диагноза.
За какво е
Електрофорезата може да се извърши за няколко цели, както при изследователски проекти, така и при диагностика, тъй като това е проста и евтина техника. По този начин електрофорезата може да се извърши за:
- Идентифицирайте вируси, гъбички, бактерии и паразити, като това приложение е по-често в изследователски проекти;
- Тест за бащинство;
- Проверете експресията на протеини;
- Идентифицирайте мутации, които са полезни при диагностицирането на левкемии например;
- Анализирайте видовете циркулиращ хемоглобин, които са полезни при диагностицирането на сърповидно-клетъчна анемия;
- Оценете количеството протеини, налични в кръвта.
Според целта на електрофорезата може да се наложи провеждането на други допълнителни тестове за лекаря, за да завърши диагнозата.
Как се прави
За да се направи електрофорезата, е необходим гелът, който може да бъде полиакриламид или агароза в зависимост от целта, буфер за електрофореза и вана, маркер за молекулно тегло и флуоресцентен багрил, в допълнение към UV или LED светлинно оборудване, известно още като трансиллюминатор.
След приготвянето на гела трябва да се постави конкретен предмет, за да се направят кладенчетата в гела, наричан популярно гребен, и да се остави гелът да стегне. Когато гелът е готов, просто нанесете веществата в ямките. За това в една от ямките трябва да се постави маркер за молекулно тегло, положителен контрол, който е веществото, което е известно какво представлява, отрицателен контрол, който гарантира валидността на реакцията, и пробите, които трябва да бъдат анализирани. Всички проби трябва да се смесват с флуоресцентно багрило, тъй като по този начин е възможно да се визуализират лентите на трансилуминатора.
Гелът с пробите трябва да се постави в каната за електрофореза, която съдържа специфичния буферен разтвор, и след това устройството се включва, така че да има електрически ток и съответно потенциална разлика, което е важно за разделянето на частиците според според натоварването и размера им. Електрофоретичното време на работа варира според целта на процедурата и може да продължи до 1 час.
След определеното време е възможно да се види резултатът от електрофоретичното преминаване през трансилуминатора. Когато гелът се постави под UV или LED светлина, е възможно да се визуализира моделът на лентата: колкото по-голяма е молекулата, толкова по-малко тя мигрира, по-близо до кладенеца, докато колкото по-лека е молекулата, толкова по-голям е миграционният потенциал.
За да бъде валидирана реакцията, е необходимо лентите на положителната контрола да се визуализират и в отрицателната контрола да не се визуализира нищо, в противен случай е показателно, че е имало замърсяване и целият процес трябва да се повтори.
Видове електрофореза
Електрофорезата може да се извършва за различни цели и според нейното предназначение могат да се използват няколко вида гел, като най-често срещаните са полиакриламид и агароза.
Електрофорезата за идентифициране на микроорганизми е по-често да се извършва в изследователски лаборатории, но за диагностични цели електрофорезата може да се използва за идентифициране на хематологични заболявания и заболявания, които се развиват с увеличаването на количеството протеини, като основните видове електрофореза:
1. Електрофореза на хемоглобина
Електрофорезата на хемоглобина е лабораторна техника, извършена за идентифициране на различните видове хемоглобин, циркулиращи в кръвта, което дава възможност да се идентифицира наличието на заболявания, свързани със синтеза на хемоглобин. Типът на хемоглобина се идентифицира чрез електрофореза при специфично рН, в идеалния случай между 8,0 и 9,0, като се проверява модел на ленти, който може да се сравни с нормалния модел, което позволява да се идентифицира наличието на анормални хемоглобини.
За какво се прави: Електрофорезата на хемоглобина се прави, за да се изследват и диагностицират заболявания, свързани със синтеза на хемоглобин, като сърповидно-клетъчна анемия и хемоглобин С, освен че е полезна за диференциране на таласемия. Научете как да тълкувате електрофорезата на хемоглобина.
2. Протеинова електрофореза
Протеиновата електрофореза е изпит, поискан от лекаря, за да се оцени количеството протеини, циркулиращи в кръвта, и по този начин да се идентифицират заболявания. Този тест се прави от кръвна проба, която се центрофугира, за да се получи плазмата, частта от кръвта, съставена, наред с други вещества, от протеини.
След електрофореза може да се визуализира модел на ленти и впоследствие графика, в която е посочено количеството на всяка фракция протеини, което е от основно значение за диагнозата.
За какво се прави: Протеиновата електрофореза позволява на лекаря да изследва появата на множествен миелом, дехидратация, цироза, възпаление, чернодробно заболяване, панкреатит, лупус и хипертония според модела на лентата и графиката, представена в доклада за изследване.
Разберете как се прави и как да разберете резултата от протеиновата електрофореза.
Полезна ли беше тази информация?
да не
Вашето мнение е важно! Напишете тук как можем да подобрим нашия текст:
Някакви въпроси? Щракнете тук, за да получите отговор.
Имейл, на който искате да получите отговор:
Проверете имейла за потвърждение, който ви изпратихме.
Твоето име:
Причина за посещение:
--- Изберете причината си --- БолестЖивейте по-добреПомогнете на друг човекПолучете знания
Здравен специалист ли сте?
НеФизикФармацевтична сестра ДиетологБиомедицинскиФизиотерапевтКозметикДруги
Библиография
- ЕНЦИКЛОПЕДИЯ БИОСФЕРА, ЗНАЕЩ НАУЧЕН ЦЕНТЪР. Електрофореза: понятия и приложения. 2015. Налично на :. Достъп на 24 септември 2019 г.
- КАСВИ. Какво е електрофореза и защо е важно?. Наличен в: . Достъп на 24 септември 2019 г.
